抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒( 分光光度法)
产品名称： 抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒( 分光光度法)
英文名称： none
产品编号： BC0220
产品价格： 0
产品产地： 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三层
品牌商标： solarbio
更新时间： 2023-08-11T10:26:26
使用范围： null
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抗坏血酸过氧化物酶 活性测定试剂盒( 分光光度法) 说明书
货号：BC0220
规格:50 管/48 样
产品内容 ：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5ml 双蒸水充分溶解；
试剂三：液体×1 支，4℃保存。
产品 说明 ：
APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX 具有多种同功酶，分
别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化 H 2 O 2 氧化 AsA，是植物 AsA 的主要消耗者。APX 的活性直接影响到 AsA 的含量，在胁迫和解胁迫条件下，APX 与 AsA 具有一定的负相关性。APX 催化 H 2 O 2 氧化 AsA，通过测定 AsA 的氧化速率，可计算得 APX 活力。
试验中所需的仪器和试剂 ：
低温离心机、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤 ：
一、 粗酶液提取 ：
按照组织质量（g） ：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）进行冰浴
匀浆。13000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
二、 测定操作表：
1. 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 290 nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂一在 25℃中预热 30min 以上。
3. 测定管：依次在 1ml 石英比色皿中加入 100μl 上清液、700μl 预热的试剂一、100μl 试剂二和 100μl 试剂三，迅速混匀后在 290nm 测定 10 s 和 130 s 光吸收 A2 和 A1，△A =A2-A1。
APX 活力计算 ：
(1) 按样本蛋白浓度计算
活性单位定义：每毫克蛋白每分钟氧化 1μmol AsA 为 1U。
APX(μmol/min/mg prot) =△A÷(ε×d）×V 反总×10 6 ÷(Cpr×V 样)÷T=1.79×△A ÷ Cpr
（2）按样本质量计算
单位的定义：每 g 组织每分钟氧化 1μmol AsA 为 1U。
APX(U/g ) =△A÷(ε×d）×V 反总×10 6 ÷(W×V 样÷V 样总)÷T=1.79×△A ÷W
ε：AsA 在 290nm 处摩尔吸光系数为 2.8×10 3 L/mol/cm；d：比色皿光径（cm） ，1 cm；V 反总：反应体系总体积（L） ，1000μl=1×10 -3 L；10 6 ：1mol=1×10 6 μmol；V 样：加入反应体系中上清液体积（mL） ，100μl=0.1 ml；V
样总：加入提取液体积，1ml；W，样本质量，g；T：催化反应时间（min） ，2min。
注意事项 ：
配制好的试剂二 4℃保存，并且 3 天内使用完 相关文献：
《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 期刊:Gene 影响因子:2.638 PMID:29604462
《Effects of Calcium and Magnesium Fertilization on Antioxidant Activities during Cassava Postharvest Physiological Deterioration》 作者:Astride Stéphanie Mouafi Djabou, Yuling Qin, Boudjeko Thaddee, Priscila Gonzales Figueiredo, An Feifei, Luiz J. C. B. Carvalhod, Denis Ndoumou Omokolo, Kaimian Li, Nicolas Niemenak and Songbi Chen 期刊:Crop Science 影响因子:1.644 PMID:
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